DNA偶合物构建思路: Difference between revisions
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*'''''构建生物正交系统:<br>1.在目标蛋白末端基因(N端)插入琥珀密码子(TAG-终止密码子)<br>2.在培养系统中引入特定的tRNA(特异性识别TAG位点)与其对应的氨酰-tRNA合成酶(能将p-Azidophenylalanine(含有一个叠氮基团)这个非天然氨基酸连接到tRNA上)<br>3.BCN-DNA(BNN含环炔) | *'''''构建生物正交系统:<br>1.在目标蛋白末端基因(N端)插入琥珀密码子(TAG-终止密码子)<br>2.在培养系统中引入特定的tRNA(特异性识别TAG位点)与其对应的氨酰-tRNA合成酶(能将p-Azidophenylalanine(含有一个叠氮基团)这个非天然氨基酸连接到tRNA上)<br>3.BCN-DNA(BNN含环炔) | ||
=== zinc finger protein(zif268) === | |||
*'''zif268:含三个“锌指”模块,可插入连续的三个大沟(3×3)中,识别特定的基因序列(例如:5'-GCG TGG GCG-3') | |||
=== the basic leucine-zipper protein(GCN4) === | |||
*'''GCN4:通过形成二聚体,像夹子一样夹住双螺旋两侧的大沟中(通常和目标蛋白通过基因工程用连接子连接) | |||
=== SNAP-tag === | |||
*'''SNAP-tag:一种蛋白质标签,可与底物 benzylguanine (BG) 发生共价结合,BG通常可用被修饰在T上面''' | |||
Revision as of 15:23, 8 October 2025
protein
gene engineering and click chemistry
- Click Chemistry:通过叠氮基团和炔基(环炔)环加成生成三唑环结构
- 构建生物正交系统:
1.在目标蛋白末端基因(N端)插入琥珀密码子(TAG-终止密码子)
2.在培养系统中引入特定的tRNA(特异性识别TAG位点)与其对应的氨酰-tRNA合成酶(能将p-Azidophenylalanine(含有一个叠氮基团)这个非天然氨基酸连接到tRNA上)
3.BCN-DNA(BNN含环炔)
zinc finger protein(zif268)
- zif268:含三个“锌指”模块,可插入连续的三个大沟(3×3)中,识别特定的基因序列(例如:5'-GCG TGG GCG-3')
the basic leucine-zipper protein(GCN4)
- GCN4:通过形成二聚体,像夹子一样夹住双螺旋两侧的大沟中(通常和目标蛋白通过基因工程用连接子连接)
SNAP-tag
- SNAP-tag:一种蛋白质标签,可与底物 benzylguanine (BG) 发生共价结合,BG通常可用被修饰在T上面