DNA偶合物构建思路

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protein

gene engineering and click chemistry[edit]

  • Click Chemistry：通过叠氮基团和炔基(环炔)环加成生成三唑环结构
Click_Chemistry
  • 构建生物正交系统：
    1.在目标蛋白末端基因(N端)插入琥珀密码子(TAG-终止密码子)
    2.在培养系统中引入特定的tRNA(特异性识别TAG位点)与其对应的氨酰-tRNA合成酶(能将p-Azidophenylalanine(含有一个叠氮基团)这个非天然氨基酸连接到tRNA上)
    3.BCN-DNA（BNN含环炔)
生物正交

zinc finger protein(zif268)[edit]

  • zif268：含三个“锌指”模块，可插入连续的三个大沟(3×3)中，识别特定的基因序列(例如：5'-GCG TGG GCG-3')
锌指蛋白DNA偶联物

the basic leucine-zipper protein(GCN4)[edit]

  • GCN4：通过形成二聚体，像夹子一样夹住双螺旋两侧的大沟中(通常和目标蛋白通过基因工程用连接子连接)


GCN_Tbg

SNAP-tag[edit]

  • SNAP-tag：一种蛋白质标签，可与底物 benzylguanine (BG) 发生共价结合，BG通常可用被修饰在T上面

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