Editing XU1:2025/Dec

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    <title>组会汇报</title>
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    <div class="article">
        <div class="date">2025年12月3日</div>
        <h1 class="title">制备TNF-SA-DNA</h1>
        <div class="content">
            <p>1.样品稀释：生物素化TNF-α储存液 (63.4KDa 1µM)：20 µg粉末溶于317 µLdd水，分装出5管30ul冻存</p>
            <p>          Azide-DNA储存液 (100 µM)：10 µL 1mM + 90 µL dd水 分装出5管20ul冻存
            <p> DBCO-链霉亲和素储存液 (100 µM)：将1 mg DBCO-SA冻干粉短暂离心。加入 149 µL 预冷dd水，分装出5管5ul冻存 <p>
            <p>2.反应1：  3ul DBCO-SA + 15ul Azide-DNA点击化学，室温孵育4h<p>
            <p>3.10kda超滤管超滤除去游离DNA超滤至 30ul 得到10uM SA-DNA,留5ul验证<p>
            <p>4.反应2：  25ul SA-DNA + 25ul 生物素化TNF-α，室温孵育30min<p>
            <p>5.100kda超滤管超滤除去游离蛋白超滤至 50ul 得到0.5uM TNF-SA-DNA<p>
            <p>6.Native Page<p>
            <p>6.1 上样1 1 µM 生物素化TNF-α 5ul 稀释至 10ul，  <p>      
<p>   上样2 100 µM DBCO-链霉亲和素 1ul 稀释至 100ul，再取5ul稀释至 10ul<p>
<p>   上样3 10uM SA-DNA 5ul 稀释至 100ul <p>
<p>   上样4 0.5uM TNF-SA-DNA 10ul<p>

 
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