细胞房注意事项

基本操作规范

1. 物品从传递窗进入
2. 实验人员需穿戴：口罩、头套、手套、洁净服、换鞋

生物安全柜使用流程

1. 当日首次启用：
   1. 开生物安全柜及整个cell房cell房紫外
   2. 30mim后，关外间的紫外开关；开闸(黑色)，开空调通风10min后再进入。

1. 开启步骤：
   1. 关紫外灯、开灯开通风（长按）
   2. 酒精棉球擦拭台面
   3. 各耗材放入前喷洒75%酒精（补充装在传递窗下柜中）
   4. 吸头盒、孔板盖子及时闭合
   5. 试剂瓶开盖：镊子拆封口膜，酒精棉檫瓶口，镊子开盖，尽量避免接触

1. 结束步骤：
   1. 调枪，酒精棉擦拭移液枪前端。
   2. 废液缸及其他物品转移至传递窗，废液缸倒废及清洗后放回传递窗。
   3. 酒精棉消毒台面
   4. 喷洒支原体清除试剂
   5. 若后面有人用生物安全柜，上一人结束后打开生物安全柜的紫外，最后实验人员或值日晚上关闭紫外。
   6. 门口垃圾袋满后扔至楼道垃圾桶

设备灭菌要求

1. 需高压灭菌物品：实验服、EP管（不锈钢盒中）、吸头及吸头盒等耗材
2. 特殊要求：
   1. 提取cell的实验服及时灭菌

常见实验室污染及处理

1. 支原体:细菌，无细胞壁，主要细胞膜，难以通过过滤去除，污染后，无浑浊，难以观察。污染后，抑制细菌生长，诱导DC的成熟。需要定期使用支原体检测试剂盒检测，污染后丢弃cell并使用支原体清除试剂盒。
2. 黑胶虫：与cell共生（竞争），通常对抗生素无效。环境消杀，Cell提取时无菌PBS多次清洗，增大接种密度。