Editing 常用细胞房操作 (section)

==细胞保种==
*目的：长期保存细胞
#提前将冻存液预冷至4°C，冰箱放置至少30分钟。
#PBS清洗后离心后去上清
#加入4℃冻存液重悬
#转移1mL至保种管中。液氮或-80℃迅速冻存（DMSO在常温下对细胞有较大的毒性）。冻存管标注cell 操作人 日期
#备注：
##冻存液(商品化)：1640培养基-血清-DMSO=7:2:1，细胞冻存液通常包含渗透性和非渗透性保护剂。DMSO是一种能够渗透到细胞内的冷冻保护剂，降低细胞内外的电解质浓度，防止细胞内水分外渗，从而减少冰晶的形成。4℃时，其毒性会大大减弱，而且渗透速度也会加快。因此，最简单的方法是将冻存液一直放在4°C冰箱中，随用随取，用完再放回冰箱。
##冻存细胞的选择：处于对数生长期且细胞密度在80%-90%左右的细胞，以确保细胞在最佳状态。细胞密度过低可能会影响存活率。冻存时的细胞密度推荐为3×10<sup>6</sup>到1×10<sup>7</sup>细胞/mL。或者采用1/2皿人源肿瘤细胞/管，1/2皿鼠源肿瘤细胞/管。
##保种的cell没有明确保质期，复苏后一天观察细胞密度，调整培养基用量即可。