Editing 蛋白提取及WB (section)

==BCA测总蛋白==
#试剂配制
##试剂A：将10g BCA（二辛可宁酸）、20g Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>H<sub>2</sub>O、6g Na<sub>2</sub>C<sub>4</sub>H<sub>4</sub>O<sub>6</sub>2H<sub>2</sub>O、4g NaOH和5g NaHCO3溶解于1 L蒸馏水中，NaOH或Na2CO3调节pH值至11.25。
##试剂B：取2g CuSO<sub>4</sub> 5H<sub>2</sub>O溶解于蒸馏水中，定容至50ml。
##BCA工作液：试剂A:试剂B=50:1混匀，可稳定一周。
##标准蛋白质溶液:0.5mg/ml的BSA水溶液。
#实验操作
##PBS稀释组织样品5-10倍
##校正标样（n=3）的制备：将0.5mg/ml的BSA水溶液分别取0、1、2、4、8、12、16、20 uL至96孔板中。加PBS补足至20 ul。（蛋白浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL）。浓度可按需调整，该方法LLOQ为0.01 mg/mL
##20μl的样品溶液（n=3）加入到96孔酶标板中
##每孔加入200μL BCA工作液，
##37℃孵育20~30min
##自然冷却至室温。
##吸光度测定：在562nm下酶标仪比色测定，同时以空白孔作为参照。