Editing XIE/Enzyme:2025/Nov (section)

== 日期 11.3 ==

=== 1. GDH ===
取 '''GDH 1.4 mg'''，溶解于 '''2 mL PBS (1×)''' 中，形成 '''20 μM''' 溶液。  
分装于离心管（每管 '''30 μL'''，共 '''4 管'''），以及 EP 管（'''400 μL、600 μL、800 μL''' 各一管）。  
取其中 '''30 ul''' 管，加入 '''90 mL PBS (1×, 5 μM)'''。  
取 '''100 μL''' 作为待反应液，剩余 '''20 μL''' 作为凝胶对照液。

=== 2. DBCO ===
称取 '''DBCO 5 mg'''，加入 '''50 μL DMF (100 mM)''' 溶解。  
取 '''2 μL''' 稀释至 '''20 μL (10 mM)'''。

=== 3. Oligo ===
分别向 '''Seq1'''、'''Seq2''' 中加入UP 水：  
* Seq1: '''124 μL''' ''' (1 mM)''' 
* Seq2: '''79 μL'''  ''' (1 mM)'''
各分装离心管 3 支，每支 '''20 μL'''。

=== 4.反应 ===
#取 '''DBCO 溶液(10 mM)''' '''1 ul''' 加入'''待反应溶液'''，室温下，抽屉内避光孵育 5 h
#反应后的溶液，超滤离心 '''2000 转 3 min 25 ℃ ''', 吸取离心后上清液并稀释至 90 ul ，二次清洗液 90 ul
#加入 '''Seq1 (1 mM)''' '''10 ul''' 于上清液中，抽屉中孵育过夜